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產品
以羊駝VHH為代表的納米抗體技術發展迅速,Ablink構建了高質量的羊駝VHH天然庫(Su®Llama VHH Library)和全合成人源化VHH抗體庫(Su®Humanized VHH Library),幫助客戶快速篩選針對目的蛋白的天然納米抗體和人源化納米抗體。

羊駝VHH天然庫 Su®Llama VHH Library
制備步驟
1 采取未免疫的羊駝外周血液
2 分離淋巴細胞、提取總mRNA、反轉錄成CDNA
3 利用巢式PCR擴增VHH片段 ,使用Su®Assemble kit將目的VHH克隆到Su®short phagemid 載體中構建天然VHH DNA 文庫
4 將DNA文庫電轉入超級感受態細胞SS320(含helper phage)中,構建天然VHH噬菌體庫亞庫
5 將多個亞庫混合形成羊駝VHH天然庫(Su®Llama VHH Library)

Su®Llama VHH Library特點
1 通過噬菌體展示系統構建
2 包含10個亞庫( sub-libraries),總庫容為1010
3 VHH-M13PIII融合蛋白單體展示
4 在VHH和M13 PIII之間插入琥珀密碼子:在抑制性 (suppressor strains,如XL-1 Blue MRF’、TG1, DH5aF’、ER2738)中表達為VHH-M13PIII融合蛋白,展示在噬菌體表面;在非抑制性菌株(non-suppressor strains,如××××0F'、JS5菌株) 中表達為可溶性VHH蛋白,帶c-Myc標簽
5 建庫使用超級感受態細胞SS320(含helper phage);篩選使用Su®DH5aF'+M13K07 Helper phage


全合成人源化VHH抗體庫 Su®Humanized VHH Library
制備步驟
1 從天然VHH抗體庫中分離出表達好、穩定性高的單克隆,進行人源化改造
2 挑選表達好、穩定性高的人源化單克隆VHH作為模板,克隆到Su®short phagemid 載體中
3 利用Su®Kunkel Mutagenesis Kits 對CDR區域進行高通量突變,構建突變VHH DNA文庫
4 將DNA文庫電轉入超級感受態細胞SS320(含helper phage)中,構建突變VHH噬菌體庫亞庫
5 將多個亞庫混合形成全合成人源化VHH抗體庫(Su®Humanized VHH Library)

Su®Humanized VHH Library特點
1 通過噬菌體展示系統構建
2 固定CDR H1和H2區域,在CDR H3區域引入突變
3 CDR H3長度為10-20氨基酸
4 包含11個亞庫( sub-libraries),總庫容為1010
5 VHH-M13PIII融合蛋白單體展示
6 在VHH和M13 PIII之間插入琥珀密碼子:在抑制性菌株 (suppressor strains,如XL-1 Blue MRF’、TG1, DH5aF’、ER2738菌株)中表達為VHH-M13PIII融合蛋白,展示在噬菌體表面;在非抑制性菌株(non-suppressor strains,如××××0F'、JS5菌株) 中表達為可溶性VHH蛋白,帶c-Myc標簽
7 建庫使用超級感受態細胞SS320(含helper phage);篩選使用Su®DH5aF+M13K07 Helper phage


詢價與訂購

郵箱:ablink_cd@hotmail.com
電話:028-83320992
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